更新日：2013年12月10日

事例概要

　2013年4月25日、某予備校から「管内の寮で4月19日～25日の間、約20名の寮生が発熱、腹痛等の症状を呈しており、3名が入院している」と東京都北区保健所に連絡があった。寮では給食業者が寮生に朝夕の食事を提供していた。直ちに食中毒及び感染症の両面から調査を開始した。

　調査の結果、寮生92名のうち52名（全て男性）が発症していた（発症率56.5％）。主な症状は、腹痛、発熱、頭痛、下痢であった。症状別発症者数を【表1】に、日別発症者数を【図1】に示した。後述のとおり、原因食品と決定した4月17日夕食の喫食から算定した潜伏時間は、37～175.5時間であった。

　発症者及び調理従事者の検便を実施したところ、発症者26名中18名、調理従事者11名中2名からYersinia enterocolitica（血清型O8）が検出された。北区保健所は、5月1日、発症者の共通食が寮の食事に限定されること、症状及び潜伏期間が同菌のものと一致することから、寮の食事を原因とする食中毒と判断し、3日間（平成25年5月1日～5月3日）の営業停止処分とした。

　 原因食品については、検食（4月14日～20日）等を検査したところ、4月17日夕食の野菜サラダ（ポークハムカツの付合せ）から同菌が検出された。野菜 サラダを賄いとして喫食した調理従事者2名の検便からも同菌が検出されたこと、また、施設調査から、豚肉を扱った器具を介して二次汚染された可能性が高い ことから、野菜サラダを原因食品と決定した。

 検査結果

　糞便検体は、全てCIN寒天での直接分離培養で検出した。7名の発症者について糞便中のY.enterocolitica菌数を測定した結果、10³～10⁴個／ｇであった。

　原因食品を特定するために検食73検体、原材料6検体、給茶器の水1検体について検査を実施した。各食品にリン酸緩衝生理食塩水（PBS）を加え、4℃ 21日間培養後、培養液を対象に、ail 遺伝子（接着と侵入性に関与する病原因子の1つ）をターゲットとしたPCR法でスクリーニング試験を行なった。その結果、1検体（野菜サラダ）が陽性となったため、この検体から集中的に菌の分離を試みた。

　Y.enterocoliticaが検出された「野菜サラダ」の増菌培養液中には、CIN寒天に発育するYersinia以外の菌が非常に多く、Y.enterocoliticaの分離は非常に困難であった。増菌培養液に等量の0.8％KOH加生理食塩水を加え10秒間混和後に平板へ塗抹するアルカリ処理法は非常に有効であり、CIN寒天上に発育した集落から３集落を調べた結果、その全てがY.enterocoliticaであった。更に、Y.enterocoliticaＯ8群抗体を感作させた免疫磁気ビーズを作製し、培養液から集菌後にCIN寒天へ塗抹分離したところ、ほぼ純培養状にY.enterocoliticaの発育が認められ、釣菌した10集落全てがY.enterocolitica Ｏ8であった。

　今回の検査では、培養液から遺伝子検査でスクリーニング試験を行ない、陽性であった検体に集中して目的菌の分離を行うことで、効率の良い検査を実施することができた。また、培養液中に夾雑菌が多い場合は、アルカリ処理や免疫磁気ビーズ法を用いた集菌法が非常に効果的であった。しかし、食品の増菌培養に3週間、菌の分離・同定を含めると約1ヶ月を要したことから、迅速な検査を実施するためには、更に検討が必要であると考えられた。

 東京都北区保健所　東京都健康安全研究センター